Kastle-Meyer-Test - Wikipedia

Der Kastle-Meyer-Test ist ein vorläufiger Bluttest, der erstmals 1903 beschrieben wurde, ^[1] bei dem der chemische Indikator Phenolphthalein zum Nachweis des möglichen Vorhandenseins von Hämoglobin verwendet wird. Es beruht auf der peroxidaseartigen Aktivität von Hämoglobin im Blut, um die Oxidation von Phenolphthalin (der farblosen reduzierten Form von Phenolphthalein) zu Phenolphthalein zu katalysieren, das als hellrosa Farbe sichtbar ist. Der Kastle-Meyer-Test ist eine Form des katalytischen Bluttests, eine der zwei Hauptklassen forensischer Tests, die üblicherweise von Kriminalitätslaboren bei der chemischen Identifizierung von Blut eingesetzt werden. Die andere Klasse von Tests, die zu diesem Zweck verwendet werden, sind Mikrokristall-Tests, wie der Teichmann-Kristall-Test und der Takayama-Kristall-Test. ^[2]

Der Test wurde nach dem amerikanischen Agrarchemiker Joseph Hoeing Kastle (1864–1916) benannt, der 1901 den Namen erhielt , erfunden und testeten den Rohbluttest, und der deutsche Arzt und Chemiker Erich Meyer (1874–1927), der den Test 1903 modifizierte. ^[3]

Eine mutmaßliche Blutprobe wird zuerst mit einem Tupfer entnommen. Ein Tropfen Phenolphthaleinreagenz wird zu der Probe gegeben und nach einigen Sekunden wird ein Tropfen Wasserstoffperoxid auf den Tupfer aufgetragen. Wenn der Tupfer schnell rosa wird, wird vermutet, dass er positiv auf Blut getestet wird. Wenn Sie auf Zeiträume von mehr als 30 Sekunden warten, werden die meisten Tupfer natürlich rosa, wenn sie in der Luft von selbst oxidieren. ^{[ Zitat benötigt ]}

Optional kann der Tupfer zuerst mit einem Mittel behandelt werden Tropfen Ethanol, um die vorhandenen Zellen zu lysieren und eine erhöhte Empfindlichkeit und Spezifität zu erreichen. Dieser Test ist nicht destruktiv für die Probe, die aufbewahrt und für weitere Tests im Labor verwendet werden kann. Nur wenige Labore würden jedoch den für den Kastle-Meyer-Test verwendeten Tupfer für weitere Tests verwenden und stattdessen einen frischen Tupfer des ursprünglichen Flecks verwenden. ^{[ Zitat erforderlich ]}

Einschränkungen

19659011] [ edit ]

Obwohl berichtet wurde, dass der Kastle-Meyer-Test Blutverdünnungen bis auf 1:10 ⁷ feststellen konnte, gibt es eine Reihe wichtiger Einschränkungen zum Test Chemische Oxidationsmittel wie Kupfer- und Nickelsalze führen dazu, dass das Kastle-Meyer-Reagenz vor der Zugabe des Wasserstoffperoxids rosa wird. Daher ist es äußerst wichtig, zuerst das Reagens zuzugeben, dann einige Sekunden zu warten und dann das Wasserstoffperoxid zuzusetzen.

Der Kastle-Meyer-Test reagiert mit menschlichem Blut genauso wie mit jedem anderen Blut auf Hämoglobin-Basis. Daher muss ein Bestätigungstest wie der Ouchterlony-Test durchgeführt werden, um abschließend festzustellen, von welcher Art das Blut stammt.

Farbkatalytische Tests sind sehr empfindlich, aber nicht spezifisch. Der positive Farbtest allein ist nicht als positiver Blutnachweis zu verstehen. Ein negatives Ergebnis ist im Allgemeinen ein Beweis für das Fehlen nachweisbarer Mengen an Häm. In Gegenwart eines Reduktionsmittels kann jedoch ein falsches Negativ erzeugt werden. Der Test ist nicht in der Lage, konkrete Aussagen darüber zu treffen, was sich im Blut befindet.

Mechanismus [ edit ]

Das in diesem Test verwendete Phenolphthalein wurde gegenüber seiner herkömmlichen Form dahingehend modifiziert, dass es durch zwei Elektronen reduziert wurde und in alkalischer Lösung vorgelöst wurde . Dies wird typischerweise durch Kochen einer alkalischen Lösung von Phenolphthalein mit Zinkpulver erreicht, wodurch das Phenolphthalein zu Phenolphthalin reduziert wird. Bei der Reduktion verblasst die sehr intensive rosa Farbe der kationischen Form von Phenolphthalein zu einer schwachen gelben Farbe. Diese Form des Phenolphthaleins ist in Kastle-Meyer-Testkits enthalten. Um die intensive rosafarbene Farbe zu erzeugen, die auf einen positiven Test hinweist, muss das reduzierte Phenolphthalein in seine normale, farbige Form zurückoxidiert werden.

In der relevanten Reaktion reagiert Wasserstoffperoxid mit dem Hämoglobin im Blut. Phenolphthalin nimmt an diesem Prozess nicht direkt teil; Stattdessen fungiert es als externe Elektronenquelle. Bei der Reaktion mit Wasserstoffperoxid verhält sich das Häm-Zentrum von Hämoglobin wie eine Peroxidase und reduziert das Peroxid zu Wasser. Diese Aktivität verbraucht das Hämoglobin an Elektronen, die wiederum vom Phenolphthalin wieder zugeführt werden. Durch die Abgabe von Elektronen an Hämoglobin wird das Phenolphthalin wieder in das intensiv gefärbte Phenolphthalein umgewandelt. Solange das Enzym überlebt, ist die Reaktion von Häm mit Peroxid katalytisch, wodurch dieser Test sehr empfindlich auf kleine Blutmengen ist, die auf dem Testabstrich vorhanden sind. Die Hämoglobin-katalysierte Reduktion von Peroxid, die auftritt, ist in der nachstehenden Reaktion gezeigt. Die beiden Elektronen werden von Phenolphthalin geliefert:

HOOH + 2 e ^- + 2 H ⁺ → 2 H ₂ O

Der Verbrauch von Protonen im Verlauf der Reaktion hat das Wirkung der Erhöhung des pH-Werts der Lösung, aber die Menge der erzeugten Base ist im Vergleich zu der Menge der Base, die bereits in der Reagenzmischung vorhanden ist, vernachlässigbar.

Referenzen [ edit ]

1. ^ Geschichte des Kastle-Meyer-Tests: Im Jahr 1901 fanden Joseph Hoeing Kastle und Oliver March Shedd in den USA dies biologisch Das Material kann in leicht alkalischen Lösungen zur Oxidation von Phenolphthalin zu Phenolphthalein führen. [Siehe:JosephHKastleundOliverMarchShedd(1901)"PhenolphthalinalsReagensfürdieoxidierendenFermente" American Chemical Journal 26 (6): 526–539. Im Jahr 1903 stellte Erich Meyer in Deutschland fest, dass auch Blutzellen die Reaktion auslösen könnten. [See: Erich Meyer (1903) "Beiträge zur Leukocytenfrage. Fermente der Leukocyten" [Contributions on the leukocyte question. Enzymes of the leukocytes] Münchener Medizinische Wochenschrift 50 (35): 1489–1493; siehe insbesondere S. 1492-1493.] 1906 fanden Kastle und Amoss heraus, dass Hämoglobin im Blut die Reaktion auslöste. [Siehe:JosephHKastleundHaroldLindsayAmoss Variationen in der Peroxidaseaktivität des Blutes in Gesundheit und Krankheit. US. Hygienic Laboratory Bulletin Nr. 31. (Washington, D.C., US-amerikanisches Gesundheitswesen und Marine Hospital Service, US-Regierung, Druckerei, 1906).] 1909 stellte Kastle fest, dass der Test für sehr verdünnte Blutproben empfindlich war. [Siehe:JosephHKastle Chemische Tests auf Blut. US. Hygienic Laboratory Bulletin Nr. 51. (Washington, DC: Öffentliches Gesundheits- und Seekrankenhaus der USA, US Gov't. Printing Office, 1909).] Im Jahr 1908 stellte Pozzi-Escot (der damals in Lima, Peru lebte) fest, dass der Test falsch war positive Reaktionen auf eine Reihe von Substanzen neben Blut. [See: Marius Emmanuel Pozzi-Escot (1908) "Emploi de la phénolphtaline comme réactif du sang [Use of phenolphthalin as a reagent for blood]" Bulletin des Sociétés Chimiques Belges 22 (11): 415–416.] Weitere Einzelheiten zur Geschichte des Kastel-Meyer-Tests: Robert E Gaensslen, Quellenbuch in forensischer Serologie, Immunologie und Biochemie (Ausgabe von 1989) (Washington, DC: Nationales Institut für Justiz, US-Justizministerium, 1983), Seiten 103–105. Online verfügbar.
2. ^ Meyers, Thomas C. (2006). "Kapitel 21: Serologie". In Wecht, Cyril H., Rago, John T. Forensische Wissenschaft und Recht: Untersuchungsverfahren in Strafsachen, und Family Justice . Boca Raton, FL: CRC Press, S. 410–412. ISBN 0-8493-1970-6.
3. ^ Meyers, Thomas C. (2006). "Kapitel 21: Serology ". In Wecht, Cyril H .; Rago, John T. Forensische Wissenschaft und Recht: Untersuchungsverfahren in Straf-, Zivil- und Familienjustiz . Boca Raton, FL: CRC Press. S. 410–412 ISBN 0-8493-1970-6.

O ther sources [ edit ]

• Culliford, Bryan J., Die Untersuchung und Typisierung von Blutflecken im Kriminalitätslabor, Washington, DC: US ​​Government Printing Office, 1971
• Gaensslen, Robert E., Quellenbuch in forensischer Serologie, Immunologie und Biochemie, Washington, DC: Druckerei der US-Regierung, 1983.
• Kirk, Paul L., Crime Investigation, John Wiley und Sohn, 1974.
• Forensic Science Laboratory der Metropolitan Police, Biology Methods Manual, 1978.
• Ponce, Ana Castelló; Pascual, Fernando A. Verdú, "Kritische Revision von präsumptiven Tests für Blutflecken", Forensic Science Communications, vol. 2, Juli 1999, Seiten 1–15.
• Saferstein, Richard, Forensic Science Handbook, Prentice Hall, Inc., 1982.